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Using Singular Value Decomposition to Characterize Protein–Protein Interactions by In‐cell NMR Spectroscopy 下载免费PDF全文
Subhabrata Majumder Christopher M. DeMott Dr. David S. Burz Dr. Alexander Shekhtman 《Chembiochem : a European journal of chemical biology》2014,15(7):929-933
Distinct differences between how model proteins interact in‐cell and in vitro suggest that the cytosol might have a profound effect in modulating protein–protein and/or protein–ligand interactions that are not observed in vitro. Analyses of in‐cell NMR spectra of target proteins interacting with physiological partners are further complicated by low signal‐to‐noise ratios, and the long overexpression times used in protein–protein interaction studies may lead to changes in the in‐cell spectra over the course of the experiment. To unambiguously resolve the principal binding mode between two interacting species against the dynamic cellular background, we analyzed in‐cell spectral data of a target protein over the time course of overexpression of its interacting partner by using single‐value decomposition (SVD). SVD differentiates between concentration‐dependent and concentration‐independent events and identifies the principal binding mode between the two species. The analysis implicates a set of amino acids involved in the specific interaction that differs from previous NMR analyses but is in good agreement with crystallographic data. 相似文献
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Dr. Matthew A. B. Baker Dr. Nejc Rojko Dr. Bríd Cronin Prof. Gregor Anderluh Prof. Mark I. Wallace 《Chembiochem : a European journal of chemical biology》2014,15(14):2139-2145
Equinatoxin II (EqtII), a sea anemone cytolysin, is known to oligomerize to form pores that spontaneously insert into membranes. Crystallographic and cryo‐EM studies of structurally similar cytolysins offer contradictory evidence for pore stoichiometry. Here we used single‐molecule photobleaching of fluorescently labeled EqtII to determine the stoichiometry of EqtII oligomers in supported lipid bilayers. A frequency analysis of photobleaching steps revealed a log‐normal distribution of stoichiometries with a mean of 3.4±2.3 standard deviations. Comparison of our experimental data with simulations of fixed stoichiometries supports our observation of a heterogeneous distribution of EqtII oligomerization. These data are consistent with a model of EqtII stoichiometry where pores are on average tetrameric, but with large variation in the number of subunits in individual pores. 相似文献
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钢梁与混凝土柱单剪板连接节点形式简单、施工方便。在单剪板节点结构设计中,通常把该类节点简化成铰接节点,认为其只传递剪力和轴力,忽略梁端弯矩的作用,从而高估了预埋件的承载能力,给结构留下了安全隐患。为了研究单剪板连接节点的受力性能,对3个不同螺栓布置的钢梁-钢筋混凝土柱单剪板连接节点进行了静力加载试验,研究了螺栓数量、螺栓直径等因素对试件破坏模式、荷载-挠度曲线和约束弯矩的影响。结果表明:钢梁-钢筋混凝土柱单剪板连接节点的约束弯矩随螺栓群惯性矩的增大而增大;试件的承载力和刚度受高强螺栓布置数量的影响较大,受螺栓直径的影响较小。在试验研究的基础上,建立了单剪板连接节点的受力简化模型,根据模型给出了约束弯矩计算方法和弹性阶段节点折算偏心距计算公式,其计算结果与试验结果吻合较好。 相似文献
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钛合金表面CrAlTiN单层涂层冲蚀损伤机理研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的主要开展钛合金表面制备Cr Al Ti N单层涂层后的撞击实验,探究不同条件下钛合金表面的冲蚀损伤规律,揭示钛合金表面的冲蚀损伤机理。方法采用多弧离子镀技术在TC4钛合金表面制备Cr Al Ti N单层涂层,并利用空气炮发射速度为300m/s的单个钢珠,在不同角度(30°、45°、60°、90°)下对涂层进行撞击损伤模拟。采用扫描电镜对撞击形貌进行观察,结合撞击表面的元素分析结果,探究钢珠撞击涂层表面的冲蚀损伤机理。结果 90°攻角下,涂层的破损主要由撞击产生的裂纹和涂层表面"液滴"的剥落共同作用引起。45°、30°攻角与60°攻角的撞击相似,损伤主要由两部分组成:一部分是垂直作用产生的裂纹和撞击导致的液滴剥落引起的涂层损伤;另一部分是切向作用引起的摩擦磨损和摩擦过程中产生的温度效应导致的钢珠熔覆。能谱图点44处主要含有Fe2O3、Ti N两种物质,说明该点的涂层已经破坏,并且在切削磨损的同时,钢珠撞击的损伤还伴随着氧化磨损。结论在300m/s的速度下,冲蚀损伤最严重部位为钢珠与涂层接触部位。冲蚀过程中会因温度效应使钢珠熔覆在涂层表面,涂层表面越粗糙,则熔覆物越多。涂层的损伤主要源于垂直分量导致裂纹的萌生和切向的犁削作用。 相似文献
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目的制造一种磨粒有序排布、具有正前角的无结合剂端面金刚石磨削工具。方法采用波长为1030 nm、脉宽为250 fs的钛蓝宝石飞秒激光对单晶金刚石(SCD)进行烧蚀加工,首先研究加工工艺参数(特别是烧蚀轨迹间距)对金刚石加工效率及表面质量的影响。采用预先设计的激光扫描路径,基于优化后的工艺参数在SCD表面加工出微磨粒阵列结构,各磨粒呈方锥台形结构,其顶部倾斜角约为100°。在此基础上,对微磨粒阵列进行烧蚀加工,将所有微磨粒顶部的倾斜角减小至小于90°。结果当激光烧蚀轨迹间距为10.0μm时,烧蚀加工表面RMS粗糙度最小。确定了一种微磨粒边缘倾斜角小于90°且磨粒有序排布的新型无结合剂金刚石端面磨削工具的激光制备方法和工艺,采用该工艺加工的磨削工具表面质量好,轮廓精度高,磨粒平均正前角约为9.80°。结论采用飞秒激光可以高质量、高效率地制备出磨粒有序排布的新型正前角无结合剂金刚石端面磨削工具,该工具有望在硬脆材料磨削中减小磨削力,提高材料表面完整性。 相似文献
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目前针对超低渗油藏单井产能的地质因素分析极少。文章通过姬塬地区长4+5超低渗油层组为研究目的层,以岩芯分析、测井解释数据统计、粒度分析资料、储层宏微观表征等技术手段,对影响目的层位的主要地质因素进行分析。结果表明,研究区目的层单井产能受沉积相类型、储层类型、储层微观参数与有效厚度等多种地质因素控制。具体表现在水下分流河道、前缘席状砂等以砂岩含量居多的沉积微相对应层位单井产能较高;储层内孔隙的空间组合类型、孔渗参数大小均影响储层的渗透与流通程度,从而影响其单井产能。总结不同地质因素对姬塬地区长4+5超低渗油藏的控制作用,可以为研究区今后的布井开发,或进一步的方案调整提供有利的依据。 相似文献
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